TRABAJO PRACTICO N° 10

 

NOTA: a fin de facilitar el estudio, al final de cada unidad temática se indican las fuentes bibliográficas (u otras) que deberán ser consultadas.

I) INTRODUCCION A LA GENÉTICA MOLECULAR

• Genómica, Transcriptómica y Proteómica: concepto. Genoma, transcriptoma y proteoma humanos. Su variedad intra e interindividual, normal y patológica.
• Ácidos nucleicos y proteínas: componentes químicos. Estructura del ADN según el modelo de Watson y Crick. Estructura del ARN. Tipos de ARN. Diferencias entre el ADN y el ARN. ( De Robertis, cap 2). Aminoácidos presentes en las proteínas humanas. Simbolización con una y tres letras. Estructura primaria, secundaria, terciaria y cuaternaria.
• Organización funcional del material genético: Organización y cambios funcionales de la cromatina. Secuencias de ADN no repetidas y poco repetidas. ADN repetitivo (De Robertis, cap 12). Familias de genes. Concepto molecular de gen. Estructura básica de un gen: promotor, secuencias reguladoras (amplificadores e inhibidores), segmento codificador (exones e intrones), secuencia de terminación (De Robertis, cap 13). Unidades funcionales multigénicas.
• Flujo de la información genética y control de la expresión génica: Etapas en las que se puede
  controlar la expresión génica en eucariotas (Alberts, cap 9).

II) PROCESOS QUE EXPERIMENTAN LOS ACIDOS NUCLEICOS Y LAS PROTEÍNAS

• Síntesis: Replicación del ADN, transcripción de éste en ARN, y traducción del ARN o síntesis proteica: concepto, descripción general, localización subcelular y factores que intervienen (enzimas, otras proteínas, complejos multiproteicos, secuencias) en cada caso. Síntesis del ADN telomérico.
• Procesamiento del ADN, ARN y proteínas en elementos funcionales: Cambios en la tensión helicoidal, reordenamiento y metilación genómicos. Impronta genómica. Adición del capuchón, metilación, corte y empalme y edición del ARN. Formación y localización subcelular de complejos ribonucleoproteicos. Transporte, adición de grupos prostéticos, "trimming", plegamiento y activación/inhibición enzimática de las proteínas.
• Degradación: Vías de degradación de los ácidos nucleicos y las proteínas. Localización. Tipos y roles de nucleasas y proteasas.
• Recombinación del ADN: concepto. Función de las recombinasas y resolvasas (Solari, cap.9).
• Mutación del ADN: concepto. Ejemplos de mutágenos físicos, químicos y biológicos (transposones). Mutaciones espontáneas e inducidas. Mutaciones somáticas y germinales. Mutaciones puntuales: sustituciones, inserciones y deleciones. Mutaciones de más de una base (subcromosómicas o segmentarias): inserciones y deleciones. Efecto de las mutaciones en las secuencias codificantes (mutaciones sin sentido, con cambio de sentido, con cambio del marco o pauta de lectura, silenciosas). Efecto de las mutaciones en las secuencias no codificantes (mutación del promotor, de secuencias reguladoras, de sitios de corte y empalme). Otras mutaciones: transposones, repeticiones expandidas de tripletes. Concepto de mutaciones cromosómicas. (Jorde, cap3).
• Reparación del ADN: concepto. Estrategias que no requieren molde, que utilizan una cadena u otra molécula como molde, y que por carecer de molde tienden a error. Eliminación de dímeros de timina. Lectura de prueba por la ADN polimerasa. Reparación mediante nucleasa reparadora. Eliminación de hipoxantinas y uracilos introducidos por desaminación. Reparación en casos de desaminación. Lesiones que se reparan y enzimas que intervienen en cada caso. (De Robertis, cap.17).

III) TÉCNICAS BÁSICAS EN GENÉTICA MOLECULAR: DESCRIPCIÓN BREVE, APLICACIÓN E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

• Aislamiento de ácidos nucleicos y proteínas. Digestión enzimática (concepto y utilidad
  de las enzimas de restricción) y otros métodos de fraccionamiento. Separación electroforética. Hibridación: Concepto. Southern, Northern y Western blots. Sondas de ADN genómico, ADN complementario y de ARN: concepto y utilización.. Secuenciamiento del ADN. Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) (Jorde, cap 3). Micromatrices.

BIBLIOGRAFIA

• Genética Humana. Fundamentos y aplicaciones en Medicina, 3ª. Edición. A. J. Solari.
• Genética Médica, 1ª. Edición. L.B. Jorde, J. Carey, R. White.
• Fundamentos de Biología Celular y Molecular, 4ª Edición. E. De Robertis, J. Hib.
• Clases teóricas.
• Aula virtual, página web de la Cátedra: www.biolme.4d2.net